CRISPR技术让基因编辑触手可及
CRISPR技术介绍
CRISPR技术提供了一种能够对基因组进行特异性定点改造的工具,它的出现代表了基因组工程的巨大突破。CRISPR/Cas9和CRISPR/Cpf1为研究者在大量的实验细胞类型中实现单核苷酸多态性(SNPs), 插入, 基因敲除和基因抑制提供了一个工具。
科学家最初发现CRISPR是研究细菌,特别是E. coli的免疫系统抵御病毒感染的机制。通过生成RNA和一种被称为Cas9的基因编辑核酸酶,能够靶向剪切入侵病毒的DNA的基因序列。接下来研究人员意识到除了病毒,同样的方法可被应用于鉴别和编辑任何DNA序列,从而开启了基因组工程的全新领域。
Cas9作为“分子剪刀”,是一种用于剪切DNA序列的核酸酶,该序列可以被CRISPR引导的RNA识别。这种生化反应产生的“剪切”可以使基因失活,修复或者完全替换为一个新的DNA片断。
- CRISPR/Cas9系统工作原理为:
通过引导RNA:crRNA:tracrRNA 复合体或sgRNA分子指引Cas9核酸酶在某个特定的基因组位点上进行剪切。如下图所示,sgRNA的可编辑靶向特异区域通过RNA-DNA 碱基互补结合到基因组靶位点,启动DNA链剪切。S. pyogenes Cas9剪切的启动基于基因组靶位点临近带有(5′) NGG (3′)的PAM序列的5′-端。

Cpf1是最近发现的一种Cas9同源体,Cpf1比Cas9更小,使用一种保守的前间区序列邻近基序(PAM)定位不同的序列。特别适用于富含AT碱基的基因组/区域。在单核苷酸多态性(SNPs)设计和基因敲除过程中,由于它可以产生一种交错切口,有利于促进同源修复。
- 应用
CRISPR与Cas9或Cpf1核酸酶的组合是应用于基因组工程和研究的有效方法。CRISPR技术的应用涉及基因治疗,药物开发,农业,动物模型,生物燃料,生物材料等更多领域。
- 优势
Synthego公司拥有好的设计,研发和生产过程,确保CRISPRevolution产品家族的品质及供货速度。公司的专利技术可实现:
▪ 高达90%的编辑效率
▪ 工作时间比质粒克隆法缩短了4倍
▪ 成本降低80%
产品介绍
CRISPRevolution是针对CRISPR基因组编辑和研究设计的合成RNA组合。您提供序列,我们帮您合成。让您用实惠的价格就能拥有高保真及高精确性基因编辑性能的RNA片断。
EZ RNA试剂盒
EZ RNA CRISPR 试剂盒提供简单,精确,低成本的基因编辑,适用于crRNA:tracrRNA and sgRNA两种模式。
CRISPR/Cas9 EZ RNA试剂盒为研究人员提供简便的CRISPR基因组编辑方案或者帮助寻找新的CRISPR 。试剂盒包含进行成功转染、CRISPR/Cas9基因定位和编辑的所有试剂成分。试剂盒具有sgRNA和cr:tracrRNA两种引导RNA模式,同时您可选择是否购买Cas9核酸酶。
1. Single Guide RNA模式
sgRNA无需退火,可直接进行转染。它是一种用户设计的17-20mer的单链RNA序列,可结合基因组中与PAM序列临近的17-20mer的DNA靶序列。
在序列的3′-末端添加了80mer的Synthego支架(Scaffold)序列,您收到的sgRNA将是如下结构:
5′-AAUUUCACAGCUGCACAUA+Synthego Scaffold-3′
2. Two-Part cr:tracrRNA模式
2.1 crRNA
我们会在用户提供的17-20mer的单链RNA序列的3′-末端加上22mer的连接(linker)序列,您收到的crRNA将是如下结构:
5′-AAUUUCACAGCUGCACAUA+Synthego Linker-3′
2.2 tracrRNA
我们已经在S. pyogenes 的CRISPR/CAS系统基础上对72mer的tracrRNA序列进行了优化,加上了拥有专利的连接(linker)序列。因此您无需另外提供EZ tracrRNA 序列。
技术服务
公司日前已与美国SYNTHEGO公司签署合作协议,在中国大陆地区开展CRISPR-Cas9基因编辑产品推广及相关技术服务工作。