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传统湿转、半干转、快速湿转,谁是你的WB实验"真命天子"
2025-03-24
还在为Western blot转膜效率头疼?不同样本、不同蛋白总翻车?一篇干货带你解锁三大转膜技术的关键差异,实验效率翻倍不是梦!
三大转膜法"比武擂台"
01 传统湿转法:经典中的"老司机"
☑️ 适用场景:>100kDa大分子量蛋白、膜蛋白
☑️ 核心优势:低温环境减少蛋白降解,均一性好
⚠️ 硬伤:耗时2小时+,缓冲液用量大(费钱警告!)
💡 操作口诀:冰浴降温要彻底,滤纸浸润排气泡
02 半干转法:省时省料的"效率派"
☑️ 适用场景:10-100kDa常规蛋白
☑️ 核心优势:15-60分钟闪电战,缓冲液仅需5-10ml
⚠️ 硬伤:易发热需严格控压,大分子易截留
💡 操作秘籍:滤纸裁剪精确到毫米,电压梯度要优化
03 快速湿转法:新晋"六边形战士"
☑️ 适用场景:10-200kDa蛋白都适用
☑️ 核心优势:20分钟极速转膜
⚠️ 硬伤:暂无
💡 黑科技加持:自带制冷却系统+增强型电极
艾普拜生物CycleBlot快速湿转仪
20分钟快速湿转,完美融合传统湿转和半干转的优势,既拥有湿转法的稳定,又享受半干转的速度,一招解决转印痛点!
进阶实验锦囊
通用避坑指南
- 甲醇激活PVDF膜别超15秒!
- 见气泡如见仇敌——玻璃棒滚压大法
- 转膜后立即标记膜角落(防结果混淆)
特殊样本处理
- 磷酸化蛋白:全程4℃操作+添加磷酸酶抑制剂
- 膜蛋白:缓冲液加0.1% SDS助攻
艾普拜生物WB产品线一站式解决方案